ٹیسٹ کا خلاصہ اور وضاحت
لیپٹوسپائروسس دنیا بھر میں پایا جاتا ہے اور یہ انسانوں اور جانوروں کے لیے ایک عام ہلکا سے شدید صحت کا مسئلہ ہے، خاص طور پر گرم اور مرطوب آب و ہوا والے علاقوں میں۔لیپٹوسپائروسس کے قدرتی ذخائر چوہا کے ساتھ ساتھ پالتو جانوروں کی ایک بڑی قسم ہیں۔انسانی انفیکشن L. interrogans کی وجہ سے ہوتا ہے، Leptospira کی جینس کا روگجنک رکن۔انفیکشن میزبان جانور کے پیشاب کے ذریعے پھیلتا ہے۔
انفیکشن کے بعد، لیپٹاسپائرز خون میں موجود رہتے ہیں جب تک کہ اینٹی ایل کی پیداوار کے بعد 4 سے 7 دنوں کے بعد وہ صاف نہیں ہو جاتے۔ابتدائی طور پر IgM کلاس کے اینٹی باڈیز سے پوچھ گچھ کرتا ہے۔خون، پیشاب اور دماغی اسپائنل سیال کی کلچر نمائش کے بعد 1 سے 2 ہفتوں کے دوران تشخیص کی تصدیق کا ایک مؤثر ذریعہ ہے۔اینٹی ایل کا سیرولوجیکل پتہ لگانا۔interrogans اینٹی باڈیز بھی ایک عام تشخیصی طریقہ ہے۔ٹیسٹ اس زمرے کے تحت دستیاب ہیں: 1) مائکروسکوپک ایگلوٹینیشن ٹیسٹ (MAT)؛2) ایلیسا؛3) بالواسطہ فلوروسینٹ اینٹی باڈی ٹیسٹ (IFATs)۔تاہم، مذکورہ بالا تمام طریقوں کے لیے ایک نفیس سہولت اور اچھی تربیت یافتہ تکنیکی ماہرین کی ضرورت ہوتی ہے۔
Leptospira IgG/IgM ایک سادہ سیرولوجیکل ٹیسٹ ہے جو L. interrogans سے اینٹی جینز کا استعمال کرتا ہے اور بیک وقت ان مائکروجنزموں کے IgG اور IgM اینٹی باڈیز کا پتہ لگاتا ہے۔یہ ٹیسٹ غیر تربیت یافتہ یا کم سے کم ہنر مند اہلکاروں کے ذریعے کیا جا سکتا ہے، لیبارٹری کے بوجھل آلات کے بغیر اور نتیجہ 15 منٹ میں دستیاب ہو جاتا ہے۔
اصول
لیپٹوسپیرا IgG/IgM ریپڈ ٹیسٹ کٹ ایک پس منظر کا بہاؤ کرومیٹوگرافک ہے
immunoassayٹیسٹ کیسٹ پر مشتمل ہوتا ہے: 1) ایک برگنڈی رنگ کا کنجوگیٹ پیڈ جس میں ریکومبیننٹ L. انٹروگینز اینٹیجنز کولائیڈ گولڈ (Leptospira conjugates) اور خرگوش IgG-گولڈ کنجوگیٹس پر مشتمل ہوتے ہیں، 2) نائٹروسیلوز جھلی کی پٹی جس میں دو ٹیسٹ بینڈز ہوتے ہیں اور ایک کنٹرول بینڈ (C بینڈ)۔اینٹی ایل کا پتہ لگانے کے لیے ایم بینڈ کو مونوکلونل اینٹی ہیومن آئی جی ایم کے ساتھ پری لیپت کیا گیا ہے۔ انٹروگنز آئی جی ایم، جی بینڈ اینٹی ایل کی کھوج کے لیے ری ایجنٹس کے ساتھ پری کوٹڈ ہے۔interrogans IgG، اور C بینڈ بکری مخالف خرگوش IgG کے ساتھ پہلے سے لیپت ہے۔
جب ٹیسٹ کے نمونے کی مناسب مقدار کیسٹ کے نمونے کے کنویں میں بھیجی جاتی ہے، تو نمونہ کیسل کے عمل سے کیسٹ میں منتقل ہو جاتا ہے۔IgM اینٹی L. پوچھ گچھ اگر نمونے میں موجود ہو تو وہ لیپٹوسپیرا کنجوگیٹس سے منسلک ہو جائیں گے۔اس کے بعد امیونو کمپلیکس جھلی پر پہلے سے کوٹڈ اینٹی ہیومن آئی جی ایم اینٹی باڈی کے ذریعے پکڑا جاتا ہے، جس سے ایک برگنڈی رنگ کا ایم بینڈ بنتا ہے، جو ایک ایل کی نشاندہی کرتا ہے۔آئی جی جی اینٹی ایل. پوچھ گچھ اگر نمونے میں موجود ہو تو لیپٹوسپیرا کنجوگیٹس سے منسلک ہو جائیں گی۔اس کے بعد امیونو کمپلیکس کو جھلی پر پہلے سے لیپت شدہ ریجنٹس کے ذریعے پکڑا جاتا ہے، جس سے ایک برگنڈی رنگ کا جی بینڈ بنتا ہے، جو L. کی نشاندہی کرتا ہے۔
کسی بھی ٹیسٹ بینڈ (M اور G) کی عدم موجودگی منفی نتیجہ بتاتی ہے۔ٹیسٹ میں اندرونی کنٹرول (C بینڈ) ہوتا ہے جس میں بکرے کے مخالف خرگوش IgG/rabbit IgG-گولڈ کنجوگیٹ کے امیونو کمپلیکس کے برگنڈی رنگ کے بینڈ کی نمائش ہونی چاہیے، قطع نظر اس کے کہ کسی بھی ٹیسٹ بینڈ پر رنگ کی نشوونما ہو۔بصورت دیگر، ٹیسٹ کا نتیجہ غلط ہے اور نمونہ کو کسی دوسرے آلے سے دوبارہ جانچنا ضروری ہے۔